Flashcard FC516288
Qual é o princípio básico do sequenciamento de Sanger?
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Qual é o princípio básico do sequenciamento de Sanger?
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Resposta
O sequenciamento de Sanger determina a ordem dos nucleotídeos por síntese a partir de um primer pela DNA polimerase, usando ddNTPs fluorescentes que interrompem a elongação de forma controlada.
• DNA polimerase e primer: sintetizam uma cópia do DNA iniciando a partir do primer pela ação enzimática.
• ddNTPs fluorescentes: nucleotídeos terminadores sem grupo 3'‑OH que, quando incorporados, impedem o alongamento da cadeia de DNA.
• Fragmentos marcados: incorporação aleatória de ddNTPs gera fragmentos de diferentes comprimentos finalizados por ddNTPs marcados.
• Eletroforese capilar: separa os fragmentos por tamanho e a fluorescência permite reconstruir a sequência a partir do padrão de cores.
Veja como foi cobrado:
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