Flashcard FC701754
Quais são as etapas essenciais do Southern e Northern blot e o que elas permitem determinar?
Bioquímica e Biomoléculas
VUNESP · 2025
Quais são as etapas essenciais do Southern e Northern blot e o que elas permitem determinar?
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Resposta
Os ensaios Southern e Northern envolvem separação por eletroforese, transferência para membrana e hibridização com sonda marcada, permitindo detectar sequências específicas e estimar o tamanho molecular dos fragmentos.• Separação por eletroforese: separa ácidos nucleicos por tamanho no gel, preservando a ordem para comparação com marcador de massa molecular.
• Transferência e imobilização: transfere fragmentos para membrana sólida (nitrocelulose ou nylon) e os fixa para incubação com a sonda.
• Hibridização com sonda marcada: sonda complementar detecta sequências-alvo por sinal marcado, revelando apenas fragmentos que contêm a sequência de interesse.
• Estimativa do tamanho molecular: comparação da posição das bandas com um marcador molecular permite inferir o tamanho em pares de bases.
Veja como foi cobrado:
https://flashcardsconcursos.com.br/portal/flashcard/700375
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