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Flashcard FC701882

Como identificar especificidade do produto em PCR em tempo real usando SYBR Green?

Microbiologia

VUNESP · 2025

De acordo com o assunto Biologia e Biomedicina: Microbiologia, responda:

Como identificar especificidade do produto em PCR em tempo real usando SYBR Green?
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Resposta

A especificidade é avaliada pela curva de dissociação (melting curve), que revela picos de -dF/dT correspondentes às temperaturas de melting de cada produto amplificado.

• Ligação do SYBR: SYBR Green liga-se ao DNA dupla fita e a fluorescência é proporcional à quantidade total de produto dupla fita formado durante a amplificação.
• Limitação: SYBR não distingue sequências, portanto marca produtos inespecíficos e dímeros de primer.
• Interpretação: Um único pico nítido indica produto específico; múltiplos picos ou picos baixos sugerem produtos inespecíficos ou dímeros de primer.





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