Flashcard FC702037
Como as técnicas modernas mantêm o pareamento nativo entre as regiões VH e VL de células B ao identificar sequências de anticorpos?
Imunologia
VUNESP · 2025
Como as técnicas modernas mantêm o pareamento nativo entre as regiões VH e VL de células B ao identificar sequências de anticorpos?
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Resposta
Isolando cada célula B individualmente, capturando seu mRNA e realizando transcrição reversa e amplificação das regiões VH e VL a partir do mesmo transcript celular, preserva-se o pareamento nativo entre cadeia pesada e leve.
• Isolamento celular: separação por citometria de fluxo ou encapsulamento em gotículas para evitar mistura de transcritos de diferentes células.
• Captura de mRNA: coencapsulamento com tampão de lise e esferas de poli(dT) magnéticas que retêm o mRNA da própria célula.
• Clonagem e expressão: transcrição reversa, amplificação pareada de VH e VL e união ou clonagem em scFv/anticorpos recombinantes para triagem funcional mantendo especificidade imunológica.
Veja como foi cobrado:
https://flashcardsconcursos.com.br/portal/flashcard/700658
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