Flashcard FC702458
Como funciona a purificação por His-tag e como a tag é eluída e removida?
Sem classificação
VUNESP · 2025
Como funciona a purificação por His-tag e como a tag é eluída e removida?
Mostrar resposta e comentário
Resposta
A His-tag permite purificação por afinidade a metais imobilizados (IMAC); a proteína se liga à resina e é eluída por imidazole, mudança de pH ou quelantes, e a tag pode ser removida por proteases específicas após purificação.• Princípio: Histidinas coordenam íons metálicos imobilizados (Ni²⁺ ou Cu²⁺) na resina IMAC, retendo a proteína recombinante.
• Eluição: Eluição ocorre com imidazole em concentrações crescentes, alteração de pH ou agentes quelantes como EDTA.
• Remoção: A tag pode ser clivada por proteases específicas após a purificação.
• Posição: A His-tag é inserida no terminal N ou C conforme minimiza impacto sobre estrutura e função da proteína.
Veja como foi cobrado:
https://flashcardsconcursos.com.br/portal/flashcard/701079
Conteúdo do catálogo FC Concursos · Atualizado em