Flashcard FC702875
Qual é o princípio da fluorimetria na quantificação de ácidos nucleicos?
Sem classificação
VUNESP · 2025
Qual é o princípio da fluorimetria na quantificação de ácidos nucleicos?
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Resposta
A fluorimetria baseia-se na emissão de luz por fluoróforos que, após absorverem luz de excitação, emitem fluorescência cuja intensidade é proporcional à concentração desses fluoróforos, permitindo quantificar ácidos nucleicos por comparação com uma curva de calibração.
• Mecanismo: Fluoróforos absorvem luz de excitação e emitem fótons ao retornarem ao estado fundamental.
• Ligação a ácidos nucleicos: Corantes ligam-se ao DNA ou RNA e tornam a fluorescência dependente da quantidade de ácido nucleico presente.
• Calibração: A intensidade medida é comparada com uma curva padrão para determinar a concentração da amostra.
• Fatores limitantes: Linearidade, quenching e sinal de fundo podem alterar a relação entre intensidade e concentração.
Veja como foi cobrado:
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