Flashcard FC786168
O que caracteriza a eluição isocrática e quando se utiliza a eluição por gradiente na HPLC?
Química
Instituto AOCP · 2021
O que caracteriza a eluição isocrática e quando se utiliza a eluição por gradiente na HPLC?
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Resposta
Eluição isocrática: fase móvel com composição constante; Eluição por gradiente: composição da fase móvel varia programaticamente para aumentar a força elutiva quando a isocrática não separa bem ou é muito lenta.Explicação completa:
Em isocrática a mistura de solventes permanece constante ao longo da corrida, resultando em retenções previsíveis e execução simples.
Em gradiente a proporção de solvente orgânico ou aquoso é alterada ao longo do tempo para eluir compostos fortemente retidos, melhorar forma de pico e resolução entre analitos com ampla faixa de polaridade, exige reequilíbrio da coluna entre corridas.
Exemplo prático:
Separar uma mistura contendo um metabólito polar e um lipídio muito apolar em fase reversa. Tentativa isocrática com 90% água/10% acetonitrila deixa o lipídio retido por tempo excessivo. Usando gradiente de 10% → 90% acetonitrila em 15 min, ambos são eluídos em tempos adequados, com melhores picos, depois reequilibra-se a 10% para a próxima injeção.
Veja como foi cobrado:
https://flashcardsconcursos.com.br/portal/flashcard/784967
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