Flashcard FC872190
O que indica fluorescência detectável em controle negativo apenas após o ciclo 38 em qPCR e como prevenir?
Genética
FGV · 2026
O que indica fluorescência detectável em controle negativo apenas após o ciclo 38 em qPCR e como prevenir?
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Resposta
Fluorescência detectável somente após o ciclo 38 indica amplificação inespecífica ou contaminação muito baixa, frequentemente por dímeros de primers ou traços de DNA, e deve ser prevenida por otimização de primers e controle rigoroso de contaminação.• Amplificação inespecífica: sinal tardio próximo do limite costuma refletir dímeros de primers ou contaminação residual por traços de DNA que amplificam em ciclos tardios.
• Otimização de primers: revisar desenho para evitar complementaridade 3', ajustar comprimento e Tm, testar concentrações, usar hot-start e verificar curva de dissociação para identificar dímeros.
Veja como foi cobrado:
https://flashcardsconcursos.com.br/portal/flashcard/867773
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