Questão FC298039
A genotipagem de microssatélites STRs associada à eletroforese capilar é considerada a técnica "padrão ouro" na análise de DNA, atualmente. A respeito dos fundamentos e aplicações
Genética
IDECAN · 2021
A genotipagem de microssatélites STRs associada à eletroforese capilar é considerada a técnica "padrão ouro" na análise de DNA, atualmente. A respeito dos fundamentos e aplicações da eletroforese capilar, assinale a afirmativa INCORRETA.
- A eletroforese capilar envolve o uso de um tubo muito estreito preenchido com um polímero para que ocorra a separação dos produtos da PCR.
- Uma das desvantagens da eletroforese capilar é a utilização de altas voltagens no processo de separação, o que pode levar à degradação dos fragmentos de DNA. Nesse caso, os fragmentos sensíveis devem ser separados por eletroforese em gel.
- A utilização de um agente desnaturante, como a formamida, é essencial para manter o DNA no estado desnaturado.
- A utilização de soluções-tampão é importante para prover a corrente elétrica responsável pela separação dos fragmentos de DNA.
- Os fragmentos de DNA conjugados a fluoróforos, ao serem excitados por uma fonte de laser, emitem um fóton de comprimento de onda específico e são detectados na janela de detecção do capilar.
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Gabarito
B
Comentário do professor
A afirmação é incorreta porque a presença de altas voltagens na eletroforese capilar não implica, por si só, em degradação dos fragmentos de DNA.
O uso de campos elétricos intensos gera o fluxo eletro‑osmótico (FEO) e permite rápidas separações; a geometria do capilar (diâmetro muito pequeno) facilita a dissipação do calor gerado pelo efeito Joule, reduzindo o risco de termodegradação.
A separação é feita em capilares preenchidos por uma matriz polimérica que promove o nabedamento por tamanho, e o sistema tem controle térmico preciso; quando necessário, empregam‑se agentes desnaturantes e ajuste de condições para preservar integridade das moléculas.
Portanto, fragmentos “sensíveis” não são obrigatoriamente encaminhados para géis; a eletroforese capilar é projetada para alta resolução, velocidade e integridade analítica, tornando a alegação de degradação por voltagem equivocada.
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