Questão FC298040
A técnica de rotina muito utilizada na biologia molecular para análise de proteínas por imunodetecção, após a sua separação por eletroforese em gel e transferência para membrana ad
Genética
IDECAN · 2021
A técnica de rotina muito utilizada na biologia molecular para análise de proteínas por imunodetecção, após a sua separação por eletroforese em gel e transferência para membrana adsorvente e que, também, torna possível obter informações sobre a massa molecular e a quantidade relativa existente dessa proteína específica numa determinada amostra é conhecida por:
- “Western blotting”.
- Eletroforese em gel de campo pulsado (“Pulse Field” - PFGE).
- “Northern blotting”.
- “Eastern blotting”.
Mostrar resposta e comentário
Gabarito
A
Comentário do professor
Western blotting é uma técnica imunodetetiva usada para identificar e estimar a massa e a quantidade relativa de uma proteína após separação por gel.
Primeiro realiza‑se eletroforese em gel (geralmente SDS‑PAGE): as proteínas são separadas conforme a massa — proteínas menores migram mais.
Em seguida há a transferência do gel para uma membrana (nitrocelulose ou PVDF), permitindo acesso das sondas de detecção.
Aplica‑se bloqueio para reduzir ligações inespecíficas e depois incubação com um anticorpo primário específico; um anticorpo secundário conjugado (enzima ou fluoróforo) reconhece o primário.
A detecção (quimioluminescência, colorimetria ou fluorescência) revela bandas: a posição, comparada a um marcador de massa molecular, indica o peso, e a intensidade da banda, medida por densitometria, permite a quantificação relativa.
Conteúdo do catálogo FC Concursos · Atualizado em