Questão FC700515
Pesquisadores utilizaram um kit de mutagênese baseado em transposons, contendo um gene de resistência a antibiótico, para gerar uma biblioteca de mutantes em uma cepa bacteriana de
Microbiologia
VUNESP · 2025
Pesquisadores utilizaram um kit de mutagênese baseado em transposons, contendo um gene de resistência a antibiótico, para gerar uma biblioteca de mutantes em uma cepa bacteriana de interesse. Após a seleção em meio contendo o antibiótico, vários clones exibiram fenótipos alterados.
Assinale a alternativa que apresenta corretamente a principal vantagem de utilizar transposons nesse tipo de experimento.
- Permite a ativação da expressão de genes por promotores externos introduzidos no sistema.
- Produz RNA de fita dupla que pode ser usado para inserção de fragmentos gênicos específicos.
- Provoca inserções aleatórias no genoma, interrompendo genes e possibilitando inferência funcional.
- Promove recombinação homóloga direcionada a genes previamente selecionados.
- Atua apenas em plasmídeos, sem causar alterações no DNA cromossômico.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
Transposons são elementos de DNA móveis que se inserem em locais variados do genoma. A principal vantagem dessa abordagem é que ela produz inserções aleatórias que podem interromper genes, gerando mutações de perda de função que revelam o papel desses genes no fenótipo observado.
Como o transposon carrega um marcador de resistência, apenas as células com inserção são selecionadas em meio contendo o antibiótico, facilitando a triagem de mutantes. A seguir, basta identificar o ponto de inserção por sequenciamento para correlacionar o gene interrompido com o fenótipo.
Esse método permite uma varredura não direcionada do genoma, possibilitando a inferência funcional de genes sem necessidade de conhecimento prévio sobre alvos específicos.
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