Questão FC700663
O phage display é uma técnica moderna que utiliza bacteriófagos para expressar uma variante proteica única, como os anticorpos single-chain variable fragmente (scFv). Ante a vasta
Imunologia
VUNESP · 2025
O phage display é uma técnica moderna que utiliza bacteriófagos para expressar uma variante proteica única, como os anticorpos single-chain variable fragmente (scFv). Ante a vasta diversidade de sequências presentes nas bibliotecas de fagos, é necessário realizar uma técnica que permita o isolamento de clones capazes de se ligar à proteína-alvo. Essa técnica é chamada de
- clonagem.
- ELISA.
- biopanning.
- citometria de fluxo.
- Western blot.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
Biopanning é a técnica usada no phage display para isolar fagos que exibem variantes proteicas, como scFv, capazes de reconhecer um alvo específico.
O processo começa com a incubação da biblioteca de fagos com o antígeno, geralmente imobilizado. Em seguida há etapas de lavagem para remover fagos não ligados e eluição dos ligantes retidos, que podem ser recuperados por variação de pH ou competição com ligante livre.
Os fagos eluídos são então usados para infectar bactérias e promover a amplificação da população selecionada. Repetindo esses ciclos de enriquecimento, aumenta-se a especificidade e afinidade dos clones; ao final, fazem-se análises como ELISA ou sequenciamento para identificar os melhores ligantes.
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