Questão FC700878
Em laboratórios de análise molecular, diferentes metodologias permitem identificar patógenos, mutações e perfis genéticos com alta precisão. Cada técnica apresenta princípios espec
Sem classificação
VUNESP · 2026
Em laboratórios de análise molecular, diferentes metodologias permitem identificar patógenos, mutações e perfis genéticos com alta precisão. Cada técnica apresenta princípios específicos baseados em amplificação, detecção ou hibridização de ácidos nucleicos, tornando-se ferramentas fundamentais no diagnóstico moderno.
Uma das técnicas moleculares de diagnóstico é observada no uso
- da PCR para quantificar diretamente proteínas de membrana plasmática.
- da Western blot para amplificar fragmentos específicos de DNA.
- do sequenciamento Sanger para duplicar RNA mensageiro em larga escala.
- da qPCR para detectar e medir a quantidade de sequências-alvo de DNA em tempo real.
- da hibridização Southern para análise de perfis de expressão proteica.
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Gabarito
D
Comentário do professor
qPCR (PCR quantitativa ou em tempo real) é uma técnica que permite detectar e quantificar sequências específicas de DNA enquanto a amplificação ocorre. A cada ciclo a produção de produto é acompanhada por sinais de fluorescência, gerados por corantes intercalantes (ex.: SYBR Green) ou por sondas específicas.
O ponto central é o ciclo limiar (Ct), quando a fluorescência ultrapassa um valor de referência. O Ct é inversamente proporcional à quantidade inicial de molde: amostras com mais alvo atingem o limiar em menos ciclos.
Matematicamente a amplificação segue \(N = N_0 \times 2^n\), o que permite estimar \(N_0\) a partir do Ct. A técnica é usada para quantificação absoluta (padrões) ou relativa (comparativa) em diagnóstico, carga viral e estudos genéticos.
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