Questão FC701060
60. Durante uma das etapas para o desenvolvimento de anticorpos monoclonais, a cultura in vitro conterá uma mistura de células únicas não fundidas, mieloma-esplenócitos híbridos (c
Sem classificação
VUNESP · 2025
60. Durante uma das etapas para o desenvolvimento de anticorpos monoclonais, a cultura in vitro conterá uma mistura de células únicas não fundidas, mieloma-esplenócitos híbridos (células desejadas), mieloma-mieloma e esplenócito-esplenócito. Assinale a alternativa que descreve corretamente a base para realizar a seleção dos hibridomas.
- São selecionados utilizando polietilenoglicol (PEG). As células de mieloma HGPRT – (sensíveis ao PEG) não serão capazes de sobreviver, uma vez que a via de recuperação está bloqueada devido à ausência de HGPRT funcional e a replicação por meio da via de novo é impedida pela presença do PEG.
- São selecionados utilizando o meio hipoxantina, aminopterina e timidina (HAT). As células de mieloma HGPRT – (sensíveis ao meio HAT) não serão capazes de sobreviver, uma vez que a via de recuperação está bloqueada devido à ausência de HGPRT funcional e a replicação por meio da via de novo é impedida pela presença de timidina.
- São selecionados utilizando o meio hipoxantina, aminopterina e timidina (HAT). As células de mieloma HGPRT – (sensíveis ao meio HAT) não serão capazes de sobreviver, uma vez que a via de recuperação está bloqueada devido à ausência de HGPRT funcional e a replicação por meio da via de novo é impedida pela presença de aminopterina.
- São selecionados utilizando o meio hipoxantina, aminopterina e timidina (HAT). As células de mieloma HGPRT – (sensíveis ao meio HAT) não serão capazes de sobreviver, uma vez que a via de recuperação está bloqueada devido à ausência de HGPRT funcional e a replicação por meio da via de novo é impedida pela presença de hipoxantina.
- São selecionados utilizando o meio Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM). A seleção é realizada unicamente mantendo as células obtidas em cultura, em que, após alguns dias de cultivo, restam apenas os hibridomas, sem a necessidade de adição de qualquer novo reagente.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A seleção é feita no meio HAT, cuja lógica metabólica explica por que apenas os hibridomas sobrevivem.
A aminopterina bloqueia a síntese de novo de nucleotídeos ao inibir enzimas dependentes de folato, impedindo que a célula forme purinas e timidilato por essa via.
O meio fornece hipoxantina e timidina, substratos da via de recuperação (salvamento). Para usar essa via é necessária a enzima HGPRT, que converte hipoxantina em nucleotídeos reutilizáveis.
As células de mieloma usadas são HGPRT– e, com a via de novo bloqueada pela aminopterina, não conseguem sobreviver. Os hibridomas herdam a HGPRT funcional do esplênico e assim utilizam hipoxantina e timidina para proliferar, sendo selecionados no HAT.
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