Questão FC701061
Sobre a tecnologia phage display, assinale a alternativa incorreta.
Sem classificação
VUNESP · 2025
Sobre a tecnologia phage display, assinale a alternativa incorreta.
- A tecnologia de exibição de fagos (phage display) parte do mRNA de células B humanas que são transformadas em cDNA e posteriormente amplificadas pela reação em cadeia da polimerase (PCR) como fragmentos de anticorpos.
- Os produtos de PCR, compreendendo HCs e LCs de anticorpos, podem ser combinados para construir fragmentos variáveis de cadeia única (scFv), gerando um repertório de anticorpos em que cada anticorpo é expresso como uma proteína de fusão com uma proteína de revestimento na superfície do fago.
- Os anticorpos exibidos na superfície do fago mantêm uma capacidade de domínio de ligação ao antígeno e aqueles que exercem maior afinidade em relação aos antígenos-alvo podem ser selecionados.
- Um sequenciamento é realizado para analisar a sequência de DNA dos fagos selecionados e, posteriormente, essas sequências podem ser sintetizadas para então serem subclonadas em um sistema de expressão procariótico.
- A clonagem e a produção do mAb, resultante do método phage display, em sistemas de expressão procarióticos sempre permitem a geração de imunoglobulinas glicosiladas.
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Gabarito
Errado
Comentário do professor
A assertiva é incorreta porque confunde capacidades de expressão proteica. Sistemas procarióticos, como bactérias, não possuem o maquinário celular necessário para realizar a glicosilação complexa característica de imunoglobulinas humanas.
Produzir a sequência de um anticorpo em bactérias pode gerar fragmentos funcionais (por exemplo scFv ou partes Fab) sem glicanos, mas não permite a formação das glicoproteínas completas com os padrões de glicosilação que influenciam estabilidade, dobramento e interações do domínio Fc com receptores e complemento.
Embora existam abordagens de engenharia para inserir vias de glicosilação em bactérias, essas soluções não reproduzem fielmente a glicosilação humana; por isso a afirmação de que a clonagem em procariontes "sempre" gera imunoglobulinas glicosiladas é falsa.
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