Questão FC701068
Células de ovário de hamster chinês (CHO) emergiram como a escolha predominante para a produção de anticorpos monoclonais recombinantes (rMAbs) devido a sua robustez, facilidade de
Sem classificação
VUNESP · 2025
Células de ovário de hamster chinês (CHO) emergiram como a escolha predominante para a produção de anticorpos monoclonais recombinantes (rMAbs) devido a sua robustez, facilidade de transfecção e capacidade de modificações pós-traducionais semelhantes às das células humanas. Sobre o processo de expressão de anticorpos recombinantes nessas células, assinale a alternativa correta.
- O vetor de expressão não desempenha um papel fundamental na condução da expressão de rMAbs heterólogos em células CHO.
- Atualmente, os promotores proeminentes empregados em vetores de expressão de células CHO são derivados do vírus T7.
- Na modulação da expressão de gene estrangeiro (foreign gene), os íntrons têm a capacidade de aumentá-la. O íntron SV40 demonstrou o maior nível de expressão transgênica em condições de transfecção transitória e estável. Notavelmente, esse íntron também alcançou um aumento substancial na produção de proteínas recombinantes em células CHO.
- Vetores bicistrônicos expressam uma única proteína do plasmídeo. Para gerar rMAbs em células CHO, dois vetores bicistrônicos separados são empregados para expressar HC e LC individualmente.
- Vetores monocistrônicos permitem a expressão conjunta de LC e HC em um único mRNA, impulsionado por um único promotor. Esses vetores oferecem níveis de produção equilibrados para as proteínas LC e HC, resultando em expressão aumentada de rMAbs com agregação mínima e glicosilação consistente.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A alternativa trata do efeito positivo de íntrons sobre a expressão de um foreign gene em células CHO. Esse fenômeno, conhecido como intron-mediated enhancement, ocorre pois a presença de um íntron corretamente splicado melhora vários passos do fluxo genético: transcrição, processamento do pré-mRNA, exportação nuclear do mRNA e estabilidade/eficiência de tradução.
O íntron SV40 é amplamente utilizado porque, em ensaios de transfecção transitória e em linhas estáveis, mostrou os maiores níveis de expressão transgênica. Na prática, sua inclusão na cassette de expressão frequentemente resulta em aumento significativo da produção de proteínas recombinantes em células CHO.
Em resumo, inserir o íntron SV40 em vetores destinados a CHO é uma estratégia comprovada para elevar rendimentos de rMAbs, desde que o íntron esteja funcional e posicionado dentro da região transcrita.
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