Questão FC701074
Após a produção e a purificação de uma proteína recombinante, é necessário verificar sua pureza e quantidade. Quais métodos são mais apropriados para essas análises, respectivament
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VUNESP · 2025
Após a produção e a purificação de uma proteína recombinante, é necessário verificar sua pureza e quantidade. Quais métodos são mais apropriados para essas análises, respectivamente?
- SDS-PAGE e reação de Bradford.
- Reação de Bradford e ELISA.
- Cromatografia líquida e Western blot.
- PCR quantitativo e citometria de fluxo.
- ELISA e espectrometria de massas.
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Gabarito
A
Comentário do professor
A alternativa correta usa SDS-PAGE para avaliar pureza e a reação de Bradford para medir quantidade de proteína.
SDS-PAGE denatura e recobre proteínas com SDS, separando-as por massa molecular em gel. A análise das bandas revela a presença de contaminantes e a integridade da proteína recombinante; uma única banda forte indica alta pureza. Pode também estimar massa através de marcador.
A reação de Bradford baseia-se na ligação do corante Coomassie a resíduos proteicos, provocando mudança de absorbância medida tipicamente a 595 nm. É rápida e sensível para determinar concentração total quando comparada a uma curva padrão (ex.: BSA).
Em conjunto, SDS-PAGE verifica pureza e integridade, enquanto Bradford fornece a quantificação total necessária.
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