Questão FC701080
O phage display tem se consolidado como uma ferramenta poderosa para a seleção de ligantes específicos contra alvos moleculares. Sobre essa técnica, assinale a alternativa correta.
Sem classificação
VUNESP · 2025
O phage display tem se consolidado como uma ferramenta poderosa para a seleção de ligantes específicos contra alvos moleculares. Sobre essa técnica, assinale a alternativa correta.
- Permite a exibição de proteínas heterólogas na superfície de fagos para posterior seleção por afinidade.
- Baseia-se na fusão do gene de interesse ao genoma bacteriano, de forma que a proteína recombinante seja secretada e posteriormente capturada pelo capsídeo viral.
- A seleção por panning depende da internalização dos fagos pelas células-alvo, onde ocorre a replicação apenas dos fagos internalizados.
- É utilizado para a seleção de proteínas que interagem de forma inespecífica com os alvos, com o objetivo de ampliar o repertório inicial de ligantes para análises subsequentes.
- A seleção de clones específicos ocorre pela introdução de fagos mutantes em células animais, onde ocorre reconhecimento espontâneo dos ligantes com os receptores celulares.
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Gabarito
A
Comentário do professor
Phage display é uma técnica que permite a exibição de proteínas heterólogas na superfície de bacteriófagos, criando uma conexão direta entre o gene que codifica a proteína e a proteína exibida.
Na prática, o gene de interesse é incorporado por fusão gênica ao gene que codifica uma proteína do capsídeo (por exemplo pIII ou pVIII em fagos filamentosos), de modo que o produto recombinante aparece na face externa do fago.
Bibliotecas nesses vetores são confrontadas com o alvo desejado; fagos que se ligam são retidos, lavados e eluídos num processo chamado panning. Os fagos eluídos são então amplificados em bactérias, permitindo sucessivas rodadas de seleção por afinidade e enriquecimento de ligantes de alta afinidade.
Essa abordagem é amplamente usada para identificar peptídeos, fragmentos de anticorpos e proteínas com afinidade e especificidade pelo alvo.
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