Questão FC701083
O desenvolvimento de bibliotecas de anticorpos por phage display é uma estratégia fundamental para a seleção de ligantes específicos. Sobre a construção dessas bibliotecas, assinal
Sem classificação
VUNESP · 2025
O desenvolvimento de bibliotecas de anticorpos por phage display é uma estratégia fundamental para a seleção de ligantes específicos. Sobre a construção dessas bibliotecas, assinale a alternativa correta.
- O cDNA para a biblioteca é obtido a partir de RNA total extraído exclusivamente de células T ativadas, responsáveis pela produção natural de anticorpos.
- A variabilidade das bibliotecas decorre do uso de primers que reconhecem regiões conservadas que flanqueiam os domínios variáveis dos anticorpos.
- A diversidade das bibliotecas é garantida pelo uso de primers que anelam a regiões altamente variáveis nas extremidades dos genes, facilitando a clonagem.
- A variabilidade dos anticorpos exibidos nos fagos depende principalmente da escolha do vetor fágico utilizado para a clonagem dos genes.
- A expressão estável dos anticorpos na superfície dos fagos depende da integração permanente dos genes codificadores ao DNA cromossômico da bactéria hospedeira.
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Gabarito
B
Comentário do professor
Na construção de bibliotecas por phage display, a variabilidade é obtida ao amplificar por PCR os genes que codificam os fragmentos variáveis dos anticorpos.
Os primers são desenhados para se ligar a regiões conservadas que flanqueiam os domínios variáveis, como sequências de liderança, trechos de framework ou trechos próximos ao domínio constante.
Ao anelar em regiões conservadas, esses primers permitem amplificar simultaneamente um grande número de alelos e variantes de VH e VL, preservando as diferenças nas CDR, responsáveis pela especificidade.
Primers degenerados podem ser usados para cobrir polimorfismos sem comprometer o anelamento.
Os produtos amplificados, que condensam a diversidade natural do repertório de linfócitos B, são então clonados em vetores de exibição fágica, gerando a biblioteca com grande variabilidade de ligantes.
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