Questão FC701084
Durante a pandemia de covid-19, a RT-PCR foi amplamente utilizada para detecção do SARS-CoV-2, sendo considerada o padrão ouro no diagnóstico molecular. Sobre o princípio de funcio
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VUNESP · 2025
Durante a pandemia de covid-19, a RT-PCR foi amplamente utilizada para detecção do SARS-CoV-2, sendo considerada o padrão ouro no diagnóstico molecular. Sobre o princípio de funcionamento dessa técnica, assinale a alternativa correta.
- A RT-PCR detecta anticorpos virais IgM e IgG com alta sensibilidade, utilizando sondas fluorescentes.
- O RNA viral é primeiro clivado por enzimas de restrição e depois amplificado por PCR convencional.
- A RT-PCR amplifica diretamente as proteínas virais de interesse, dispensando a extração de RNA.
- A técnica envolve transcrição reversa do RNA viral em cDNA, seguido por amplificação com primers e sondas específicas.
- A RT-PCR opera em temperatura constante, o que a torna mais rápida e simples que métodos convencionais.
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Gabarito
D
Comentário do professor
A alternativa descreve corretamente o princípio da RT-PCR. Inicialmente o RNA viral é convertido em cDNA pela ação da enzima transcriptase reversa.
Posteriormente esse cDNA é amplificado por PCR com primers específicos da região alvo. Na modalidade em tempo real usam-se também sondas específicas fluorogênicas que permitem a detecção durante os ciclos de temperatura no termociclador. Os ciclos típicos incluem desnaturação, anelamento e extensão.
Esse fluxo possibilita detectar e quantificar pequenas quantidades de material genético viral; a leitura em tempo real gera um valor de Ct que indica a carga viral relativa. A precisão depende de boa extração de RNA e controles adequados.
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