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Questão FC701129

O método de sequenciamento de DNA proposto por Frederick Sanger, na década de 1970, é usado com modificações até os dias de hoje. O método tem como reagente principal e singular o

Sem classificação

VUNESP · 2025

O método de sequenciamento de DNA proposto por Frederick Sanger, na década de 1970, é usado com modificações até os dias de hoje. O método tem como reagente principal e singular o uso de:

  1. didesoxirribonucleotídeos trifosfatados.
  2. desoxirribonucleotídeos difosfatados.
  3. enzima transcriptase reversa.
  4. ribonucleotídeos difosfatados.
  5. enzima luciferase.
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Gabarito

A

Comentário do professor

Os didesoxirribonucleotídeos trifosfatados (ddNTPs) são análogos dos nucleotídeos normais usados na síntese de DNA.

Eles se distinguem por não apresentarem o grupo hidroxila no carbono \(3'\) da pentose. Essa ausência do 3'‑OH impede a formação da ligação fosfodiéster com o nucleotídeo seguinte.

Quando um ddNTP é incorporado pela DNA polimerase a partir de um primer, a cadeia em crescimento é imediatamente interrompida, ou seja, o ddNTP atua como terminador de cadeia.

No método de Sanger, quantidades controladas de ddNTPs marcados são adicionadas junto aos dNTPs, gerando fragmentos de diferentes comprimentos. A separação e detecção desses fragmentos permitem determinar a sequência do molde.

Por essa capacidade específica de provocar terminação da síntese, os ddNTPs são o reagente principal e singular que caracteriza o método de Sanger.

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