Questão FC701129
O método de sequenciamento de DNA proposto por Frederick Sanger, na década de 1970, é usado com modificações até os dias de hoje. O método tem como reagente principal e singular o
Sem classificação
VUNESP · 2025
O método de sequenciamento de DNA proposto por Frederick Sanger, na década de 1970, é usado com modificações até os dias de hoje. O método tem como reagente principal e singular o uso de:
- didesoxirribonucleotídeos trifosfatados.
- desoxirribonucleotídeos difosfatados.
- enzima transcriptase reversa.
- ribonucleotídeos difosfatados.
- enzima luciferase.
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Gabarito
A
Comentário do professor
Os didesoxirribonucleotídeos trifosfatados (ddNTPs) são análogos dos nucleotídeos normais usados na síntese de DNA.
Eles se distinguem por não apresentarem o grupo hidroxila no carbono \(3'\) da pentose. Essa ausência do 3'‑OH impede a formação da ligação fosfodiéster com o nucleotídeo seguinte.
Quando um ddNTP é incorporado pela DNA polimerase a partir de um primer, a cadeia em crescimento é imediatamente interrompida, ou seja, o ddNTP atua como terminador de cadeia.
No método de Sanger, quantidades controladas de ddNTPs marcados são adicionadas junto aos dNTPs, gerando fragmentos de diferentes comprimentos. A separação e detecção desses fragmentos permitem determinar a sequência do molde.
Por essa capacidade específica de provocar terminação da síntese, os ddNTPs são o reagente principal e singular que caracteriza o método de Sanger.
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