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Questão FC701242

O desenvolvimento de tecnologias de genética reversa revolucionou o estudo dos vírus de RNA, como o vírus influenza, permitindo a manipulação controlada de seu genoma por meio de c

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VUNESP · 2025

O desenvolvimento de tecnologias de genética reversa revolucionou o estudo dos vírus de RNA, como o vírus influenza, permitindo a manipulação controlada de seu genoma por meio de clones de DNA. Essa abordagem tem sido amplamente utilizada na produção racional de vacinas, no estudo da patogenicidade de variantes virais e na triagem de novos antivirais. No caso do vírus influenza, essa tecnologia é particularmente desafiadora devido à segmentação do genoma e à sua natureza de RNA de fita simples de polaridade negativa. Com base nesses aspectos, assinale a alternativa correta sobre o sistema de genética reversa para o vírus influenza.

  1. A infecção por vírus influenza pode ser resgatada a partir de transcrição in vitro de RNA genômico seguida de sua transfecção em células, uma vez que o genoma viral é infeccioso por si só.
  2. Como o genoma do vírus influenza é de RNA negativo e segmentado, sua replicação pode ser iniciada diretamente no citoplasma após transcrição por RNA polimerase II.
  3. O sistema de genética reversa do vírus influenza utiliza promotores da T7 RNA polimerase, uma vez que essa enzima atua eficientemente no núcleo das células eucariotas.
  4. A utilização de promotores de polimerase I na genética reversa do vírus influenza é inviável devido à localização citoplasmática do processo de replicação viral.
  5. A replicação eficiente do vírus influenza a partir de clones de DNA complementares requer a expressão simultânea de RNA genômicos negativos por promotores de polimerase I e de mRNA de proteínas virais por promotores de polimerase II.
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Gabarito

Certo

Comentário do professor

A alternativa destaca o uso de promotores da T7 RNA polimerase em sistemas de genética reversa do influenza. Esses promotores são empregados porque a T7 RNA polimerase sintetiza RNA de forma muito eficiente a partir de plasmídeos, permitindo a produção abundante de segmentos virais clonados quando a polimerase é fornecida em trans (por vacínia-T7, plasmídeo ou linhagem que a expressa).

É importante notar que a T7 é uma enzima de bacteriófago e não atua naturalmente no núcleo de células eucariotas; quando se usa esse sistema para influenza, estratégias como a expressão da T7 no local apropriado ou versões com sinal de localização nuclear são necessárias para gerar RNA viral funcional. Assim, o uso de promotores T7 visa o alto rendimento de transcrição mediante provisão exógena da polimerase.

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