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Questão FC701496

Na biologia molecular, a fluorimetria é amplamente utilizada para a quantificação de ácidos nucleicos devido à sua alta sensibilidade. O princípio de funcionamento dessa técnica é

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VUNESP · 2025

Na biologia molecular, a fluorimetria é amplamente utilizada para a quantificação de ácidos nucleicos devido à sua alta sensibilidade. O princípio de funcionamento dessa técnica é a seguinte:

  1. um processo de fluorescência em que a luz emitida é proporcional à concentração de fluoróforos naquela reação.
  2. um processo de fluorescência em que a luz emitida é proporcional à concentração de lumens naquela reação.
  3. um processo de fluorescência em que a luz emitida é proporcional à concentração de cor naquela reação.
  4. um processo de fluorescência em que a luz emitida é proporcional à concentração de íons naquela reação.
  5. um processo de fluorescência em que a luz emitida é proporcional à concentração de nitrogênio naquela reação.
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Gabarito

A

Comentário do professor

A alternativa descreve corretamente o princípio da fluorimetria: compostos chamados fluoróforos absorvem luz de excitação e, ao retornarem ao estado fundamental, emitem fótons. A intensidade dessa emissão é diretamente proporcional à concentração de fluoróforos presentes na reação, expressa por \(I \propto [F]\).

Em quantificação de ácidos nucleicos, usa-se um fluoróforo que se liga ao DNA ou RNA; mede‑se a intensidade de fluorescência e compara‑se com uma curva de calibração para obter a concentração da amostra. A técnica oferece alta sensibilidade e seletividade quando controladas linearidade, efeito de quenching e sinal de fundo.

Portanto, a relação proporcional entre sinal fluorescente e quantidade de fluoróforos é o fundamento que torna a técnica adequada à quantificação.

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