Questão FC779449
Pesquisadores trabalham na construção de uma linhagem bacteriana capaz de produzir insulina humana recombinante em larga escala e a baixo custo. Para atingir esse objetivo, utiliza
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Instituto AOCP · 2026
Pesquisadores trabalham na construção de uma linhagem bacteriana capaz de produzir insulina humana recombinante em larga escala e a baixo custo. Para atingir esse objetivo, utilizam a tecnologia do DNA recombinante, inserindo o gene humano de interesse em um vetor de expressão adequado e transformando células bacterianas para que passem a sintetizar a proteína. Nesse contexto, uma startup de biotecnologia busca otimizar o sistema produtivo, enfrentando desafios frequentes como a formação de corpos de inclusão, a necessidade de correto enovelamento proteico e a possível secreção da proteína para o meio extracelular. Considerando as bases genéticas e moleculares da biotecnologia microbiana, assinale a alternativa que apresenta corretamente um aspecto crítico desse processo.
- A utilização de promotores constitutivos é sempre preferível em biorreatores de grande escala, pois permite que a bactéria direcione toda a sua energia para a produção da proteína desde o início da fase lag, sem a necessidade de indutores químicos.
- Os corpos de inclusão são agregados citoplasmáticos de proteínas mal enoveladas que facilitam a purificação direta da proteína em sua forma ativa, dispensando etapas de renaturação (refolding) in vitro.
- A inserção de sequências de sinal (peptídeo sinal) no gene recombinante pode ser utilizada para direcionar a proteína sintetizada para o periplasma ou para o meio extracelular, facilitando o processamento e reduzindo a toxicidade intracelular.
- Como o código genético é universal, a expressão de genes de eucariotos em procariontes como a E. coli dispensa qualquer otimização de códons, já que a abundância de RNAs transportadores (tRNAs) é idêntica em todas as espécies.
- A produção de proteínas glicosiladas (com adição de açúcares) é realizada com alta eficiência por Escherichia coli, sendo esta a principal razão pela qual bactérias são preferidas em relação a leveduras ou células de mamíferos para a produção de anticorpos complexos.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A peptídeo sinal é uma sequência aminoacídica adicionada ao N‑terminal da proteína recombinante que a direciona ao sistema de secreção da bactéria, como as vias Sec ou Tat. Durante ou após a translocação, essa sequência é removida pela signalase, liberando a proteína no periplasma ou no meio extracelular.
O direcionamento para o periplasma oferece um ambiente mais oxidativo e contém enzimas como as proteínas Dsb que favorecem a formação de pontes dissulfeto e o enovelamento correto, reduzindo a formação de corpos de inclusão e a toxicidade no citoplasma. A secreção também pode simplificar a purificação.
Entretanto, a eficiência depende da escolha da sequência sinal, do sistema de expressão e do equilíbrio entre secreção e degradação, exigindo otimização experimental.
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