Questão FC779586
Durante o processo de subcultivo de células aderentes em um laboratório de biotecnologia, é necessário separá-las da superfície do frasco de cultura. Segundo os procedimentos proto
Sem classificação
Instituto AOCP · 2025
Durante o processo de subcultivo de células aderentes em um laboratório de biotecnologia, é necessário separá-las da superfície do frasco de cultura. Segundo os procedimentos protocolares para o cultivo de células de mamíferos, esse processo pode ser realizado por
- filtração a vácuo.
- centrifugação diferencial.
- adição de enzimas, como a tripsina.
- resfriamento rápido com nitrogênio líquido.
- exposição direta à radiação ultravioleta.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A adição de enzimas, como a tripsina, promove a dissociação enzimática das células aderentes pela clivagem de proteínas que mediam a adesão ao substrato.
A tripsina age sobre componentes da matriz extracelular e proteínas de adesão celular, como integrinas, cadherinas e proteínas de ligação (ex.: fibronectina), reduzindo as interações célula-superfície e permitindo o desprendimento.
No protocolo habitual remove‑se o meio, lava‑se com PBS, adiciona‑se tripsina‑EDTA, incuba‑se até as células ficarem arredondadas e então neutraliza‑se com meio contendo soro para interromper a ação enzimática.
É essencial controlar tempo e temperatura para preservar a viabilidade e integridade celular, evitando exposição excessiva que prejudique a recuperação pós‑subcultivo.
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