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Questão FC779599

No laboratório de ensino e pesquisa em análises clínicas de uma faculdade, amostras de 100 pacientes foram obtidas para determinação sérica de glicose, em uma pesquisa clínica. Foi

Sem classificação

Instituto AOCP · 2025

No laboratório de ensino e pesquisa em análises clínicas de uma faculdade, amostras de 100 pacientes foram obtidas para determinação sérica de glicose, em uma pesquisa clínica. Foi necessário preparar com antecedência os materiais, os equipamentos e os reagentes requeridos durante o experimento. Para a execução da técnica, os seguintes itens devem estar disponíveis: kit de reagentes para dosagem de glicose; uma pipeta automática para o volume de 10 μL e outra para o volume de 1.000 μL; ponteiras para pipetas automáticas de 10 μL e de 1.000 μL; tubos de ensaio; estante para tubos de ensaio; banho-maria; fotômetro para leitura de absorbância em 505 nm; cronômetro e recipiente para descarte de tubos e ponteiras após uso. A bula do teste descreve o seguinte procedimento: misturar 1 mL de reagente com 10 μL da amostra, incubar em banho-maria a 37 °C por 10 minutos e, em seguida, determinar a absorbância em 505 nm; a cor da reação é estável por 30 minutos.

Considerando que falhas podem ocorrer durante o preparo e execução da técnica, assinale a alternativa correta.

  1. Se for usado 2,0 mL de reagente, ao invés de 1,0 mL, serão pipetados 20 μL da amostra para corrigir o erro.
  2. Se cada pipetagem demorar 15 segundos e se todas as 100 amostras forem pipetadas de uma só vez, haverá tempo suficiente para ler todas as absorbâncias antes que a cor das reações perca estabilidade.
  3. Se a pipeta automática for ajustada para um volume de 50 μL, ao invés de 10 μL, os valores encontrados serão os mesmos do que no procedimento correto.
  4. Se o banho-maria estiver em temperatura de 20 °C, as reações irão ocorrer da mesma maneira que em 37 °C.
  5. Se a leitura das absorbâncias for realizada em 545 nm, os resultados finais serão aceitáveis.
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Gabarito

A

Comentário do professor

A correção baseia-se em manter a mesma razão entre volume da amostra e volume do reagente para preservar a concentração relativa do analito e, assim, a absorbância. Usamos regra de três proporcional: \(V_{amostra\_novo}=V_{amostra\_orig}\times\frac{V_{reagente\_novo}}{V_{reagente\_orig}}\).

Aplicando os valores: \(V_{amostra\_novo}=10\ \mu L\times\frac{2000\ \mu L}{1000\ \mu L}=20\ \mu L\). Portanto, ao dobrar o reagente de 1,0 mL para 2,0 mL, deve-se dobrar o volume da amostra para 20 μL para manter as condições analíticas.

A incubação e a leitura (37 °C, 10 min; absorbância em 505 nm; cor estável por 30 min) permanecem válidas porque a proporção reagente/amostra é preservada.

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