Questão FC867778
Em uma investigação criminal, duas amostras biológicas (A e B) são analisadas por qPCR com curva padrão conhecida e eficiência da reação adequada. A amostra A apresenta um ciclo de
Sem classificação
FGV · 2026
Em uma investigação criminal, duas amostras biológicas (A e B) são analisadas por qPCR com curva padrão conhecida e eficiência da reação adequada. A amostra A apresenta um ciclo de quantificação (Cq) menor que o da amostra B.
Considerando os princípios da PCR em tempo real, essa diferença indica que
- a amostra A possui menos DNA alvo do que a amostra B.
- o Cq menor indica que a reação de qPCR falhou na amostra A.
- o Cq menor indica contaminação da amostra B.
- não é possível inferir nada sobre a quantidade de DNA com base no Cq.
- a amostra A possui maior quantidade de DNA alvo do que a amostra B.
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Gabarito
Errado
Comentário do professor
qPCR mede o ciclo em que a fluorescência ultrapassa um limiar. O Cq é esse ponto de quantificação: quanto menor o Cq, mais cedo a amostra atingiu o limiar.
Portanto, se a amostra A tem Cq menor que a amostra B, isso indica que a amostra A possuía maior quantidade inicial do DNA alvo, pois precisou de menos ciclos para gerar sinal detectável.
Com curva padrão conhecida e eficiência adequada, essa diferença pode ser transformada em razão quantitativa. Seja E a eficiência por ciclo (E≈2 para 100%):
QA/QB = \(E^{(Cq_B - Cq_A)}\). Assim, diferenças de Cq traduzem-se em fatores de diferença na quantidade inicial.
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