Questão FC444724
Nas últimas décadas, vêm sendo progressivamente adotadas técnicas moleculares para o diagnóstico de doenças infecciosas, como a PCR. Devido à sua capacidade em detectar agentes inf
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2024
Nas últimas décadas, vêm sendo progressivamente adotadas técnicas moleculares para o diagnóstico de doenças infecciosas, como a PCR. Devido à sua capacidade em detectar agentes infecciosos com alta sensibilidade e especificidade, sem necessidade de se encontrar microrganismos viáveis na amostra biológica, a PCR tornou-se uma ferramenta valiosa e muito confiável para o diagnóstico e monitoramento de doenças.
Com pertinência a esse tema, julgue o item subsequente.
A PCR em tempo real utiliza um termociclador que também é capaz de realizar a excitação do fluoróforo e a detecção de fluorescência.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A afirmação é correta: o equipamento da PCR em tempo real (qPCR) reúne, além do controle térmico, um termociclador com sistema óptico capaz de excitar fluoróforos e detectar a fluorescência gerada pela reação.
Esse sistema óptico inclui uma fonte de luz (LED ou laser), filtros e/ou elementos dicroicos para selecionar comprimentos de onda e um detector (fotodiodo, PMT ou CCD) que registra a intensidade de fluorescência a cada ciclo.
Com isso é possível acompanhar a amplificação em tempo real, gerando curvas de amplificação e determinando o ponto de corte, o Ct, quando a fluorescência atravessa um limiar preestabelecido.
Reagentes comuns são corantes intercalantes (SYBR Green) ou sondas marcadas (TaqMan); a quantificação baseia‑se no crescimento exponencial ideal \(N = N_0 \times 2^n\) e na relação inversa entre Ct e a quantidade inicial de molde.
Essa integração térmico‑óptica é o que torna a qPCR uma ferramenta robusta para diagnóstico e monitoramento de infecções.
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