Questão FC444725
Nas últimas décadas, vêm sendo progressivamente adotadas técnicas moleculares para o diagnóstico de doenças infecciosas, como a PCR. Devido à sua capacidade em detectar agentes inf
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2024
Nas últimas décadas, vêm sendo progressivamente adotadas técnicas moleculares para o diagnóstico de doenças infecciosas, como a PCR. Devido à sua capacidade em detectar agentes infecciosos com alta sensibilidade e especificidade, sem necessidade de se encontrar microrganismos viáveis na amostra biológica, a PCR tornou-se uma ferramenta valiosa e muito confiável para o diagnóstico e monitoramento de doenças.
Com pertinência a esse tema, julgue o item subsequente.
Uma das vantagens da realização de PCR em tempo real com marcadores como o SYBR green é o fato de o marcador ser específico para as sequências alvo
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Gabarito
Errado
Comentário do professor
O item está ERRADO. O corante SYBR Green é um intercalante que se liga a qualquer DNA de fita dupla, ou seja, não distingue sequências específicas.
A especificidade na PCR em tempo real depende do pareamento dos primers com a sequência alvo e do controle das condições de reação. SYBR Green apenas reporta a quantidade total de DNA de fita dupla formado durante a amplificação.
Para avaliar se o produto é o desejado, costuma‑se usar a curva de dissociação (melting curve), que detecta produtos inespecíficos ou dímeros de primers, mas essa análise não transforma o corante em específico para a sequência alvo.
Portanto, afirmar que SYBR Green é específico para as sequências alvo é incorreto.
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