Questão FC444746
No que concerne às técnicas de sequenciamento de DNA, julgue o item seguinte. O sequenciamento de Sanger é um método fundamental para determinar a ordem dos nucleotídeos no DNA por
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2025
No que concerne às técnicas de sequenciamento de DNA, julgue o item seguinte.
O sequenciamento de Sanger é um método fundamental para determinar a ordem dos nucleotídeos no DNA por meio da utilização de DNA polimerase, primers e ddNTPs fluorescentes, que interrompem a síntese do DNA de forma controlada.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A assertiva está correta porque descreve com precisão os princípios do método de Sanger.
No método, a DNA polimerase estende um molde a partir de um primer, incorporando nucleotídeos normais e, ocasionalmente, ddNTPs. Esses ddNTPs são análogos que carecem do grupo 3'‑OH e, quando incorporados, promovem a terminação de cadeia.
Os ddNTPs usados atualmente são marcados fluorescentemente, o que permite detectar fragmentos terminados de diferentes comprimentos por eletroforese capilar e ler a sequência pela cor de cada pico.
A expressão "de forma controlada" refere‑se ao controle experimental da reação: a adição de ddNTPs em concentrações apropriadas e a detecção das etiquetas fluorescentes garantem que se obtenha um conjunto ordenado de terminações que torna possível determinar a sequência do DNA.
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