Em relação à técnica de CRISPR-Cas9, julgue o item a seguir. Para realizar o corte na região desejada, a proteína Cas9 depende da presença de uma sequência chamada PAM (protospacer

Gabarito

Certo

Comentário do professor

A técnica CRISPR-Cas9 utiliza a endonuclease Cas9, guiada por um RNA guia, para localizar sequências específicas no DNA.

Além da complementaridade entre o RNA guia e a região-alvo, a enzima exige a presença de uma curta sequência adjacente chamada PAM (protospacer adjacent motif), próxima ao sítio de corte.

A PAM atua como sinal de reconhecimento que permite a ligação estável da Cas9 e a ativação de sua atividade endonucleolítica. Sem a PAM, não ocorre o corte, mesmo com correspondência perfeita entre guia e DNA.

Na Cas9 de Streptococcus pyogenes, a PAM típica é 5'-NGG-3' (N = qualquer nucleotídeo). Essa exigência orienta a escolha de alvos e aumenta a especificidade da edição gênica.