Questão FC444775
Um laboratório de biologia molecular está realizando um projeto para identificar a expressão de genes específicos em tecidos vegetais sob diferentes condições de estresse. As amost
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Um laboratório de biologia molecular está realizando um projeto para identificar a expressão de genes específicos em tecidos vegetais sob diferentes condições de estresse. As amostras de tecido foliar precisam ser coletadas em campo, transportadas por período prolongado ao laboratório e processadas para a extração de RNA de alta qualidade, preservando-se sua integridade. Além disso, é necessário preparar um tampão de lise e assegurar que todos os materiais utilizados estejam devidamente esterilizados para evitar contaminação. A qualidade do RNA extraído será fundamental para os resultados subsequentes das análises de expressão gênica.
A partir das informações apresentadas nessa situação hipotética, julgue o item a seguir.
Uma forma de se prevenir a degradação de RNA é o seu aquecimento a 95 °C por 15 minutos na presença de MgOH2 e CaCl2.
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Gabarito
Errado
Comentário do professor
A assertiva está errada. Aquecer RNA a 95 °C na presença de íons divalentes como \( \mathrm{Mg(OH)_2} \) e \( \mathrm{CaCl_2} \) favorece a degradação química e enzimática. O grupo 2'-OH do ribonucleotídeo realiza ataque nucleofílico sobre o grupo fosfato, promovendo clivagem espontânea da cadeia; calor e íons divalentes aumentam a taxa dessa hidrólise e podem estabilizar estados de transição que facilitam a quebra da cadeia.
Além disso, muitos RNases dependem de íons divalentes para atividade; portanto, a presença de Mg2+ ou Ca2+ e temperatura elevada pode aumentar a degradação. Para preservar RNA, use temperaturas baixas, soluções estabilizadoras como RNAlater, congelamento em azoto líquido, e agentes quelantes como EDTA, além de reagentes e consumíveis livres de RNase.
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