Questão FC444776
Um laboratório de biologia molecular está realizando um projeto para identificar a expressão de genes específicos em tecidos vegetais sob diferentes condições de estresse. As amost
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Um laboratório de biologia molecular está realizando um projeto para identificar a expressão de genes específicos em tecidos vegetais sob diferentes condições de estresse. As amostras de tecido foliar precisam ser coletadas em campo, transportadas por período prolongado ao laboratório e processadas para a extração de RNA de alta qualidade, preservando-se sua integridade. Além disso, é necessário preparar um tampão de lise e assegurar que todos os materiais utilizados estejam devidamente esterilizados para evitar contaminação. A qualidade do RNA extraído será fundamental para os resultados subsequentes das análises de expressão gênica.
A partir das informações apresentadas nessa situação hipotética, julgue o item a seguir.
Para a extração de RNA total, as folhas devem ser imediatamente congeladas em nitrogênio líquido após a coleta e maceradas ainda congeladas, sendo necessário o tratamento prévio da vidraria com dietilpirocarbonato (DEPC) para que se assegure a utilização de material livre de RNases.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
Nitrogênio líquido deve ser usado imediatamente após a coleta para congelar as folhas, porque a rápida redução de temperatura interrompe a atividade enzimática e metabólica, protegendo a integridade do RNA. O congelamento rápido evita degradação por RNases endógenas e externos.
Macerar as amostras ainda congeladas garante que o tecido não descongele durante o processamento, minimizando exposição do RNA a RNases e preservando a qualidade do material para extração.
O tratamento prévio da vidraria com DEPC é adotado para inativar RNases presentes em superfícies e soluções aquosas, assegurando que os reagentes e recipientes sejam compatíveis com manipulação de RNA e contribuindo para resultados confiáveis nas análises de expressão gênica.
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