Questão FC444793
No que se refere aos métodos de manipulação do DNA por engenharia genética para a criação de organismos geneticamente modificados, julgue o item a seguir. O CRISPR/Cas9 depende de
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2025
No que se refere aos métodos de manipulação do DNA por engenharia genética para a criação de organismos geneticamente modificados, julgue o item a seguir.
O CRISPR/Cas9 depende de uma endonuclease guiada por RNA, que cria quebras de fita simples no DNA, reparadas por recombinação homóloga ou união de extremidades não homólogas.
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Gabarito
Errado
Comentário do professor
A afirmativa está errada porque o sistema CRISPR/Cas9 padrão não gera quebras simples, mas sim quebras de fita dupla (DSB) no DNA.
O complexo é guiado por uma sgRNA (crRNA+tracrRNA em uma única molécula) que reconhece a sequência complementar adjacente ao PAM. A nuclease Cas9 possui duas subunidades catalíticas (HNH e RuvC) que cortam cada uma das fitas, produzindo a DSB.
Essas DSBs são então reparadas pela célula via reparo por união de extremidades não homólogas (NHEJ), frequentemente gerando indels que desativam genes, ou por recombinação homóloga (HDR), que permite inserções precisas quando há molde disponível e ocorre preferencialmente nas fases S/G2 do ciclo celular.
Existem variantes da Cas9 mutadas para agir como nickase, gerando quebras simples, mas isso é modificação específica e não o mecanismo clássico do CRISPR/Cas9.
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