Questão FC444843
Tendo em vista que a genômica e a bioinformática são fundamentais para o desenvolvimento e a aplicação da medicina personalizada e de precisão, assim como no auxílio para a transfe
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2024
Tendo em vista que a genômica e a bioinformática são fundamentais para o desenvolvimento e a aplicação da medicina personalizada e de precisão, assim como no auxílio para a transferência de informações a médicos especialistas, julgue os item a seguir, relativo a medicina de precisão.
Um desafio no desenho de primers para PCR multiplex é evitar os dímeros de primers, cuja probabilidade de ocorrência aumenta à medida que aumenta o número de regiões genômicas a serem incluídas na reação.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
Correto. Em PCR multiplex são usadas várias sequências iniciadoras ao mesmo tempo, o que eleva a chance de formação de dímeros de primers.
Os dímeros surgem quando primers apresentam complementaridade entre si, especialmente na extremidade 3', permitindo pareamento e extensão indevida. Isso consome primers e reduz a eficiência da reação, além de gerar produtos inespecíficos.
A probabilidade aumenta com o número de primers porque as interações potenciais crescem de forma combinatória. Para P primers, o número de pares possíveis é \( \frac{P(P-1)}{2} \), elevando as chances de emparelhamentos indesejados.
Por isso, no desenho de multiplex recomenda-se evitar complementaridades internas e cruzadas, ajustar Tm e concentrações, usar software de checagem e enzimas hot-start para minimizar dímeros.
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