Questão FC445192
Tendo como referência a figura precedente, que ilustra uma estrutura de anticorpos que possuem ligações dissulfeto entre as cadeias leves e pesadas, julgue o item a seguir. As menc
Imunologia
CEBRASPE (CESPE) · 2024
Tendo como referência a figura precedente, que ilustra uma estrutura de anticorpos que possuem ligações dissulfeto entre as cadeias leves e pesadas, julgue o item a seguir.
As mencionadas biomoléculas são passíveis de purificação por cromatografia de afinidade que apresente, covalentemente ligados à fase estacionária, anticorpos secundários que reconheçam tais moléculas.
Mostrar resposta e comentário
Gabarito
Certo
Comentário do professor
A afirmação está correta. A cromatografia de afinidade retém moléculas por interação específica entre um ligante imobilizado na fase estacionária e o analito; quando o ligante são anticorpos secundários covalentemente ligados, eles reconhecem epítopos das imunoglobulinas alvo e as capturam seletivamente.
As imunoglobulinas mantêm sua conformação nativa por ligações dissulfeto entre cadeias leve e pesada, o que preserva os epítopos reconhecidos pelos anticorpos secundários durante a purificação em condições não redutoras.
A imobilização covalente do anticorpo secundário garante estabilidade da fase estacionária e evita sua eluição junto com a proteína alvo. A lavagem remove impurezas e a eluição é obtida por mudança de pH, força iônica ou competidor específico, permitindo recuperar anticorpos íntegros.
Em prática, também são usadas matrizes como Protein A/G que ligam o Fc, mas o uso de anticorpos secundários permite escolher especificidade por isotipo ou região (Fc/Fab), aumentando a seletividade da purificação.
Conteúdo do catálogo FC Concursos · Atualizado em