Questão FC445768
O gráfico acima apresenta os dados de crescimento bacteriano em sistema fechado (batelada) de diferentes isolados e linhagens. Os cinco cultivos foram realizados simultaneamente, e
Biotecnologia
CEBRASPE (CESPE) · 2025
O gráfico acima apresenta os dados de crescimento bacteriano em sistema fechado (batelada) de diferentes isolados e linhagens. Os cinco cultivos foram realizados simultaneamente, em frascos separados e nas mesmas condições de espaço, volume, temperatura, agitação e meio de cultivo. A aferição do crescimento foi realizada a cada hora, no período total de 24 h, pela medição da turbidez do meio de cultivo líquido no comprimento de ondas de 600 nm. Os isolados selvagens A, B e C são da mesma espécie, mas foram obtidos de solos de diferentes regiões do Brasil. Após o sequenciamento e a comparação dos genomas dos 3 isolados, foi identificada uma deleção de 3 aminoácidos no sítio ativo da enzima X do isolado A e a inserção de um transposon na região 3` do gene codificante de uma bomba de H+ (prótons) da membrana citoplasmática do isolado B. O isolado C foi modificado por engenharia genética com a deleção dos mesmos 3 aminoácidos que são ausentes no sítio ativo da enzima X do isolado A, gerando a linhagem mutante D. O isolado C também foi modificado com a inserção do transposon observado no isolado B, no mesmo locus, gerando a linhagem mutante E.
Considerando as informações contidas no gráfico e no texto anteriormente apresentados, julgue o item a seguir.
Com 14 h de cultivo a densidade celular do isolado A é menor que a da linhagem E, mas não é possível aferir a viabilidade celular dessas duas culturas, nesse ponto das curvas, utilizando-se esse método de quantificação.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
O enunciado afirma que, aos 14 h, a densidade celular do isolado A é menor que a da linhagem E e que não é possível aferir a viabilidade usando o método apresentado. Isso está correto porque o gráfico refere-se à medida de turbidez (OD600), que quantifica dispersão de luz pelo material em suspensão.
A OD600 correlaciona-se com biomassa ou número total de partículas que dispersam luz, mas não distingue células vivas de células mortas, debris ou agregados. Variações em tamanho celular, morfologia ou aglomeração também alteram a leitura.
Portanto, mesmo havendo diferença de OD entre A e E aos 14 h, essa técnica não permite afirmar se a diferença se deve a maior número de células viáveis. Para avaliar viabilidade seria necessário realizar contagem de UFC (CFU), colorações de exclusão de corante ou citometria de fluxo com marcadores de viabilidade.
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