Questão FC445850
Uma proteína específica presente em uma solução que contém uma mistura de cinco proteínas foi analisada com o objetivo de se caracterizar a massa molecular, o ponto isoelétrico, a
Biotecnologia
CEBRASPE (CESPE) · 2024
Uma proteína específica presente em uma solução que contém uma mistura de cinco proteínas foi analisada com o objetivo de se caracterizar a massa molecular, o ponto isoelétrico, a composição de aminoácidos e a sequência de aminoácidos dessa proteína. O sequenciamento deve determinar pelo menos 30% da estrutura primária. O método de separação e análise utilizado para atingir tal objetivo permitiu o isolamento da proteína de interesse, separando-a das outras quatro proteínas, além de sua visualização por meio de marcação com prata e uma estimativa de sua massa molecular. A amostra contendo a proteína isolada por esse método foi dividida em alíquotas, denominadas I, II e III.
Acerca dessa situação hipotética, julgue o item a seguir.
Os resultados descritos para o método utilizado são compatíveis com o que seria obtido por uma separação e análise por eletroforese.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A descrição é compatível com eletroforese, especialmente com a técnica de eletroforese bidimensional (IEF seguido de SDS‑PAGE). A primeira dimensão (focalização isoelétrica) separa proteínas pelo ponto isoelétrico e a segunda pelo tamanho, permitindo estimativa da massa molecular.
A visualização por coloração com prata é condizente, pois essa técnica é sensível e usada para detectar bandas/spot em géis. A proteína isolada pode ser excisada do gel e dividida em alíquotas para análises distintas.
Do gel excisado obtêm‑se digestões em‑gel e subsequente sequenciamento por espectrometria de massas, capaz de gerar cobertura peptídica suficiente para determinar ≥30% da estrutura primária. Também é possível obter composição de aminoácidos e sequenciamento parcial por métodos clássicos após extração do gel.
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