Questão FC445853
Uma proteína específica presente em uma solução que contém uma mistura de cinco proteínas foi analisada com o objetivo de se caracterizar a massa molecular, o ponto isoelétrico, a
Biotecnologia
CEBRASPE (CESPE) · 2024
Uma proteína específica presente em uma solução que contém uma mistura de cinco proteínas foi analisada com o objetivo de se caracterizar a massa molecular, o ponto isoelétrico, a composição de aminoácidos e a sequência de aminoácidos dessa proteína. O sequenciamento deve determinar pelo menos 30% da estrutura primária. O método de separação e análise utilizado para atingir tal objetivo permitiu o isolamento da proteína de interesse, separando-a das outras quatro proteínas, além de sua visualização por meio de marcação com prata e uma estimativa de sua massa molecular. A amostra contendo a proteína isolada por esse método foi dividida em alíquotas, denominadas I, II e III.
Acerca dessa situação hipotética, julgue o item a seguir.
A aplicação da alíquota II em um sistema de isoeletrofocalização permitirá a determinação da sequência de aminoácidos da proteína de interesse.
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Gabarito
Errado
Comentário do professor
A afirmativa é errada. A isoeletrofocalização (IEF) é uma técnica de separação baseada no ponto isoelétrico da proteína, ou seja, no pH em que a proteína apresenta carga elétrica líquida nula. Ela permite separar isoformas e avaliar pureza, mas não fornece informação sobre a ordem dos resíduos aminóácidos.
O sequenciamento da proteína exige métodos que leiam ou deduzam a sequência primária, como a degradação de Edman em proteínas intactas ou a digestão enzimática seguida de espectrometria de massas (MS/MS). Essas abordagens geram fragmentos ou espectros que permitem identificar resíduos e montar pelo menos 30% da cadeia.
Portanto, aplicar a alíquota II em IEF pode ajudar a determinar o pI e a pureza da fração isolada, mas não permite determinar a sequência de aminoácidos da proteína.
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