Questão FC446188
O ensaio que determina o perfil de acessibilidade da cromatina à enzima transposase Tn5 hiperativa, denominado ensaio ATAC-Seq, consiste em incubar a cromatina com a transposase Tn
Questões sem classificação de assunto (Biologia e Biomedicina)
CEBRASPE (CESPE) · 2025
O ensaio que determina o perfil de acessibilidade da cromatina à enzima transposase Tn5 hiperativa, denominado ensaio ATAC-Seq, consiste em incubar a cromatina com a transposase Tn5 para que ela clive e marque o DNA de fita dupla com adaptadores de sequenciamento. Os fragmentos de DNA marcados, após serem purificados, são amplificados por meio da técnica da reação em cadeia da DNA polimerase (PCR) e então sequenciados. Além do perfil de acessibilidade da cromatina, as leituras de sequenciamento podem também identificar regiões da cromatina na qual se ligam fatores de transcrição.
Tendo o texto precedente como referência inicial, julgue o item a seguir, relativo ao ensaio ATAC-Seq.
A reação de amplificação citada no texto em questão é repetida ciclicamente por meio de uma série de alterações de temperatura, o que possibilita a produção de muitas cópias de fragmentos específicos de DNA.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
PCR envolve realmente uma série de alterações de temperatura repetidas ciclicamente para gerar muitas cópias de fragmentos específicos de DNA.
Em cada ciclo ocorrem etapas distintas: desnaturação (separação das fitas), anelamento (fixação dos primers) e extensão (síntese pela DNA polimerase termoestável).
Os primers definem a especificidade dos fragmentos amplificados e a DNA polimerase termoestável permite a repetição dos ciclos sem degradação da enzima. A amplificação é exponencial, idealmente dobrando o número de cópias a cada ciclo, ou seja \(2^n\) cópias após n ciclos.
No contexto do ATAC-Seq, essa reação amplifica os fragmentos marcados com adaptadores, produzindo material suficiente para o sequenciamento.
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