Questão FC446471
Em um laboratório de bioquímica e biologia molecular de plantas, é necessário fracionar proteínas de um extrato obtido a partir de folhas. O protocolo inclui uma etapa de precipita
Química
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Em um laboratório de bioquímica e biologia molecular de plantas, é necessário fracionar proteínas de um extrato obtido a partir de folhas. O protocolo inclui uma etapa de precipitação fracionada de proteínas com sulfato de amônio, seguido por centrifugação a 15.000 g por 30 minutos com o uso de uma centrífuga refrigerada. Após a centrifugação, o pellet (fração insolúvel) deve ser ressolubilizado em um tampão específico para análise posterior. Além disso, um conjunto separado de amostras contendo compostos termoestáveis será seco em uma estufa a 60 °C. Durante todo o processo, os equipamentos utilizados devem ser manuseados, limpos e mantidos adequadamente para garantir a qualidade das análises e evitar falhas.
A partir da situação hipotética anterior, julgue o item a seguir.
A centrifugação a 10.000 RPM em um rotor de 20 cm de raio por 10 min após a precipitação com sulfato de amônio é suficiente para sedimentar proteínas insolúveis, mas demanda o uso de uma ultracentrífuga.
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Gabarito
Errado
Comentário do professor
A assertiva é errada porque confunde RPM com força centrífuga real e afirma necessidade de ultracentrífuga sem justificar.
Calcule a força relativa (RCF) com \(RCF = 1{,}118\times10^{-5}\times r(cm)\times RPM^{2}\). Para \(r=20\) cm e \(RPM=10.000\): \(RCF \approx 1{,}118\times10^{-5}\times20\times(10.000)^{2}\approx22.360\times g\).
Uma força de ~22.000 g é suficiente para sedimentar proteínas precipitados por sulfato de amônio e é alcançável em centrífugas de alta velocidade refrigeradas. Ultracentrífugas são usadas para forças muito maiores (tipicamente >100.000 g), não sendo exigidas nesse caso. Além disso, recomenda-se sempre referir-se à RCF em vez de RPM, pois a mesma rotação gera forças diferentes conforme o raio do rotor.
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