Questão FC446474
Um técnico de laboratório de bioquímica foi encarregado de realizar uma série de análises envolvendo a determinação da concentração de proteínas em amostras biológicas aplicando o
Química
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Um técnico de laboratório de bioquímica foi encarregado de realizar uma série de análises envolvendo a determinação da concentração de proteínas em amostras biológicas aplicando o método de Bradford. Para isso, ele utilizou uma solução padrão de albumina bovina (BSA) para a curva de calibração, e vidrarias como pipetas graduadas, béqueres e cubetas de quartzo para o espectrofotômetro. Durante os procedimentos, notou que os resultados apresentaram variações inesperadas entre leituras consecutivas da mesma amostra e entre replicatas. Ao revisar o método de preparo de amostras, percebeu que algumas pipetas apresentavam resíduos das mesmas soluções, utilizadas anteriormente; que as cubetas de quartzo estavam parcialmente opacas devido a arranhões; e que o tempo de uso da lâmpada do espectrofotômetro havia ultrapassado em 2 anos o limite previsto pelo fabricante.
Tendo a situação hipotética apresentada como referência, julgue o item a seguir.
Caso as amostras biológicas cuja concentração de proteínas se pretende determinar apresentem componentes particulados em suspensão, é adequado o uso de centrifugação de forma a evitar que partículas possam interferir com o feixe de luz do espectrofotômetro.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
Sim. A presença de partículas em suspensão provoca espalhamento de luz e turbidez, o que gera leituras instáveis e imprecisas no ensaio de Bradford. A centrifugação permite clarificar a amostra, removendo partículas que interferem no feixe do espectrofotômetro.
Proceda centrifugando a amostra e transferindo cuidadosamente o supernatante límpido para análise, evitando perturbar o pellet. Condições típicas são centrifugação em microtubo a aproximadamente 5.000–14.000 x g por alguns minutos, ajustando conforme o tamanho das partículas.
Tenha cautela para não remover proteínas agregadas desejadas e considere filtração em complemento quando adequado. Sempre use cubetas limpas e íntegras para garantir leituras confiáveis.
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