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Questão FC446484

Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram utiliza

Química

CEBRASPE (CESPE) · 2025

Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram utilizados métodos de análise para identificação e quantificação de tal enzima no meio de cultivo. A identificação foi feita por digestão da enzima e sequenciamento dos peptídios, mediante espectrometria de massa. A massa molecular média da enzima foi determinada como 55 kDa.

 

Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.

 

Apesar de nem sempre ser diretamente acoplada à cromatografia, a espectrometria de massa com ionização por desorção a laser é suficiente para a determinação de massa molecular da enzima, como a descrita na situação em análise.

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Gabarito

Certo

Comentário do professor

O item está correto. A espectrometria de massa com ionização por desorção a laser, especialmente a técnica MALDI-TOF, permite determinar diretamente a massa molecular de proteínas intactas na faixa de ~55 kDa com boa precisão.

O princípio envolve geração de íons (geralmente singly charged) a partir da matriz e medição do tempo de voo (TOF) para obter o valor de m/z, o que fornece a massa da molécula. MALDI-TOF aceita amostras purificadas ou semi‑purificadas e é relativamente tolerante a sais e contaminantes comuns em meios de cultivo.

Além da massa intacta, a técnica é compatível com digestão enzimática seguida de análise dos peptídeos (peptide mass fingerprinting e MS/MS) para identificação e mapeamento de sequências e de modificações pós‑traducionais.

Portanto, MALDI-TOF é suficiente e apropriada para a determinação da massa da enzima descrita no enunciado.

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