Questão FC446504
Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram utiliza
Química
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram utilizados métodos de análise para identificação e quantificação de tal enzima no meio de cultivo. A identificação foi feita por digestão da enzima e sequenciamento dos peptídios, mediante espectrometria de massa. A massa molecular média da enzima foi determinada como 55 kDa.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
A digestão da enzima para identificação por LCMS deve ser feita utilizando-se aminopeptidase, que é vantajosa em relação a outras proteases por produzir a grande maioria dos peptídios com radicais polares no C-terminal.
Mostrar resposta e comentário
Gabarito
Errado
Comentário do professor
Errado. A digestão para identificação por LC-MS/MS não é feita com aminopeptidase como escolha preferencial. Aminopeptidases removem resíduos amino terminais de forma processiva, gerando produtos heterogêneos em comprimento e menos previsíveis para pesquisa em banco de dados.
A protease padrão em proteômica é a tripsina, que cliva no lado C-terminal de resíduos de lisina (K) e arginina (R), exceto quando há prólina (P) na posição seguinte. Essa especificidade produz peptídeos de tamanho adequado e com resíduos básicos no C-terminal, melhorando a ionização positiva e os padrões de fragmentação (íons b e y), o que facilita a identificação por búsqueda em bases de dados.
Portanto, a afirmação de vantagem da aminopeptidase é incorreta para análises típicas de identificação proteica por LC-MS/MS.
Conteúdo do catálogo FC Concursos · Atualizado em