Questão FC446505
Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram utiliza
Química
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Em um projeto de prospecção de fungos com o objetivo de produção enzimática, obteve-se uma condição de cultivo adequada ao aumento de secreção da enzima de interesse. Foram utilizados métodos de análise para identificação e quantificação de tal enzima no meio de cultivo. A identificação foi feita por digestão da enzima e sequenciamento dos peptídios, mediante espectrometria de massa. A massa molecular média da enzima foi determinada como 55 kDa.
Considerando essa situação hipotética, julgue o item a seguir.
A injeção de uma mistura de peptídios trípticos dessa enzima, em um sistema cromatográfico de fase reversa acoplado a um espectrômetro de massa com analisadores do tipo quadrupolo e tempo de voo, fornece dados suficientes para a identificação da enzima em um banco de dados.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A afirmação está correta. A digestão triptítica gera múltiplos peptídeos representativos da proteína de 55 kDa, que podem ser separados por cromatografia de fase reversa antes da ionização.
Num sistema LC-MS/MS com Q-TOF, o quadrupolo seleciona íons precursores e a célula de colisão promove fragmentação (CID/HCD), gerando espectros MS/MS com íons de sequência (b/y) analisados pelo TOF com alta resolução e precisão de massa.
Esses espectros fornecem padrões de massas e fragmentos suficientes para algoritmos de busca (p. ex. Mascot, SEQUEST, MaxQuant) compararem com entradas em bancos como UniProt, permitindo identificação inequívoca quando há cobertura sequencial adequada.
Assim, a injeção da mistura triptítica em LC-Q-TOF MS/MS fornece dados suficientes para identificação proteica por busca em banco de dados.
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