Questão FC446535
Um técnico de laboratório de bioquímica foi encarregado de realizar uma série de análises envolvendo a determinação da concentração de proteínas em amostras biológicas aplicando o
Química
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Um técnico de laboratório de bioquímica foi encarregado de realizar uma série de análises envolvendo a determinação da concentração de proteínas em amostras biológicas aplicando o método de Bradford. Para isso, ele utilizou uma solução padrão de albumina bovina (BSA) para a curva de calibração, e vidrarias como pipetas graduadas, béqueres e cubetas de quartzo para o espectrofotômetro. Durante os procedimentos, notou que os resultados apresentaram variações inesperadas entre leituras consecutivas da mesma amostra e entre replicatas. Ao revisar o método de preparo de amostras, percebeu que algumas pipetas apresentavam resíduos das mesmas soluções, utilizadas anteriormente; que as cubetas de quartzo estavam parcialmente opacas devido a arranhões; e que o tempo de uso da lâmpada do espectrofotômetro havia ultrapassado em 2 anos o limite previsto pelo fabricante.
Tendo a situação hipotética apresentada como referência, julgue o item a seguir.
A opacidade parcial das cubetas pode interferir na transmitância, resultando em variações nos valores de absorbância.
Mostrar resposta e comentário
Gabarito
Certo
Comentário do professor
A opacidade parcial das cubetas interfere diretamente na **transmitância** medida, porque arranhões e depósitos promovem **espalhamento** e absorção adicional da luz que atravessa a amostra. Isso reduz a fração de luz transmitida \(T\) de forma não relacionada à concentração da substância analisada.
Como a **absorbância** é definida por \(A = -\log_{10}T\) (e, em análises quantificadas, por \(A=\varepsilon b c\)), uma alteração em \(T\) causada pela opacidade resulta em variação artificial de \(A\). Pequenas diferenças na condição da cubeta entre leituras produzem ruído e desviam pontos da curva de calibração, levando a leituras inconsistentes entre replicatas.
Portanto, cubetas limpas e sem arranhões são essenciais para garantir que as mudanças na absorbância reflitam apenas variações reais de concentração.
Conteúdo do catálogo FC Concursos · Atualizado em