Questão FC446623
Um técnico de laboratório de bioquímica foi encarregado de realizar uma série de análises envolvendo a determinação da concentração de proteínas em amostras biológicas aplicando o
Química
CEBRASPE (CESPE) · 2025
Um técnico de laboratório de bioquímica foi encarregado de realizar uma série de análises envolvendo a determinação da concentração de proteínas em amostras biológicas aplicando o método de Bradford. Para isso, ele utilizou uma solução padrão de albumina bovina (BSA) para a curva de calibração, e vidrarias como pipetas graduadas, béqueres e cubetas de quartzo para o espectrofotômetro. Durante os procedimentos, notou que os resultados apresentaram variações inesperadas entre leituras consecutivas da mesma amostra e entre replicatas. Ao revisar o método de preparo de amostras, percebeu que algumas pipetas apresentavam resíduos das mesmas soluções, utilizadas anteriormente; que as cubetas de quartzo estavam parcialmente opacas devido a arranhões; e que o tempo de uso da lâmpada do espectrofotômetro havia ultrapassado em 2 anos o limite previsto pelo fabricante.
Tendo a situação hipotética apresentada como referência, julgue o item a seguir.
O uso de pipetas com resíduos de materiais usados anteriormente explica a variação notada pelo técnico entre leituras da mesma replicata, mas não entre uma replicata e outra.
Mostrar resposta e comentário
Gabarito
Errado
Comentário do professor
A afirmação é errada porque pipetas com resíduos não provocam apenas variação entre leituras consecutivas da mesma replicata. Resíduos promovem contaminação e carryover, alterando a composição da alíquota retirada e, consequentemente, a absorbância medida.
Essa alteração pode ser aleatória, devido a variações no volume efetivamente dispensado (mudança da tensão superficial e aderência), ou sistemática, se a mesma pipeta contaminada for usada em várias replicatas. Assim surgem diferenças tanto entre leituras de uma mesma replicata quanto entre replicatas distintas.
Portanto, resíduos em pipetas explicam variações intra‑e inter‑replicatas; a prática correta exige limpeza ou uso de ponteiras descartáveis para eliminar esse viés.
Conteúdo do catálogo FC Concursos · Atualizado em