No que concerne às técnicas de sequenciamento de DNA, julgue o item seguinte. Um diferencial do sequenciamento de Sanger é a ocorrência de picos sobrepostos no caso de análises de

Gabarito

Errado

Comentário do professor

A afirmação é errada porque confunde limitação com vantagem. O sequenciamento de Sanger foi desenvolvido para ler uma sequência predominante; quando há misturas de DNA aparecem sinais sobrepostos no cromatograma, os chamados picos ambíguos, que dificultam e muitas vezes impedem a leitura confiável.

Esses picos não são uma ferramenta para analisar múltiplos alvos simultaneamente. Eles indicam presença de mais de um template na reação, gerando variação de alturas e ruido que impede deconvolução simples. Em casos de heterozigose (duas bases em um mesmo sítio) isso é tolerável, mas para misturas complexas a Sanger não fornece quantificação nem separação adequada.

Para analisar misturas usa‑se estratégias como clonagem/isolamento de amplicons, PCR alelo‑específico ou tecnologias de próxima geração (NGS), que permitem identificar e quantificar múltiplos componentes com maior precisão.