Questão FC512460
No que concerne às técnicas de sequenciamento de DNA, julgue o item seguinte. O sequenciamento de Sanger é um método fundamental para determinar a ordem dos nucleotídeos no DNA por
Genética
CEBRASPE (CESPE) · 2025
No que concerne às técnicas de sequenciamento de DNA, julgue o item seguinte.
O sequenciamento de Sanger é um método fundamental para determinar a ordem dos nucleotídeos no DNA por meio da utilização de DNA polimerase, primers e ddNTPs fluorescentes, que interrompem a síntese do DNA de forma controlada.
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Gabarito
Certo
Comentário do professor
A afirmação foi julgada CERTO porque descreve corretamente o princípio da técnica de Sanger. Nessa metodologia, uma cópia do DNA é sintetizada a partir de um primer pela DNA polimerase. No meio reacional existem nucleotídeos normais (dNTPs) e ddNTPs fluorescentes, que carecem do grupo 3'‑OH. Quando um ddNTP é incorporado, a cadeia não pode mais ser alongada, ocorrendo a terminação enzimática de forma controlada.
Como a incorporação de ddNTPs ocorre aleatoriamente, forma‑se um conjunto de fragmentos de diferentes comprimentos, cada um finalizado por um ddNTP marcado. Esses fragmentos são separados por eletroforese capilar e detectados pela fluorescência, permitindo reconstruir a ordem dos nucleotídeos a partir do padrão de cores.
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