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Questão FC870212

As técnicas de biologia molecular foram simplificadas nos últimos anos e os laboratórios as utilizam para a detecção e quantificação de agentes infecciosos e marcadores tumorais de

Sem classificação

VUNESP · 2026

As técnicas de biologia molecular foram simplificadas nos últimos anos e os laboratórios as utilizam para a detecção e quantificação de agentes infecciosos e marcadores tumorais dentre outras aplicações. A técnica mais utilizada, como técnica única ou complementar, é a PCR – Reação da Polimerase em Cadeia, na qual se amplificam segmentos específicos de DNA ou RNA criando milhões de cópias, que são então mais fáceis de detectar em uma amostra biológica.

 

Em relação a essa técnica, assinale a alternativa correta.

  1. As temperaturas de anelamento são sempre maiores que as temperaturas de desnaturação.
  2. A PCR em Tempo Real (qPCR) utiliza marcadores fluorescentes para quantificar o DNA alvo a cada ciclo, permitindo medir o DNA amplificado, sendo uma evolução da PCR convencional.
  3. RT-PCR (PCR com Transcrição Reversa) é utilizada para detectar DNA vírus (como o SARS-CoV-2), na qual a enzima transcriptase reversa converte o DNA em RNA antes da amplificação.
  4. O anticoagulante recomendado para coleta de amostras para PCR é a heparina, pois o EDTA inibe a enzima TaqPolimerase.
  5. As técnicas de PCR possuem alta especificidade, mas baixa sensibilidade e acurácia.
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Gabarito

B

Comentário do professor

PCR em Tempo Real (qPCR) é uma versão da PCR que acompanha a amplificação em tempo real usando marcadores fluorescentes. Conforme os ciclos avançam, a fluorescência emitida aumenta na proporção do produto gerado, permitindo monitorar a reação a cada ciclo.

O ponto de quantificação é o Ct (cycle threshold), o ciclo em que a fluorescência ultrapassa um limiar fixo. Quanto menor o Ct, maior a quantidade inicial de DNA alvo, porque \(Ct\) é inversamente proporcional ao logaritmo da cópia inicial.

Existem dois formatos comuns de detecção: corantes intercalantes como SYBR Green e sondas específicas como TaqMan. A qPCR possibilita quantificação absoluta ou relativa e é usada para cargas virais, expressão gênica e diagnóstico molecular.

Vantagens-chave: rapidez, sensibilidade, maior controle e menor risco de contaminação por não exigir análise pós-PCR.

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